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細胞污染怎么辦?不要慌,教你快速鑒別+處理!

更新時間:2024-12-30      點擊次數(shù):347

細胞質量決定實驗的進程與結果,相信很多小伙伴在細胞培養(yǎng)上走了不少彎路,事實上因為細胞污染而耽誤了實驗進度,影響畢業(yè)和發(fā)文章的進程的事件時常發(fā)生。

  所以今天小編整理了一下細胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的一些現(xiàn)象與處理方法,希望可以幫到大家。

  一、細菌污染

  細菌污染最為常見,一旦操作稍有不當,就會引起細胞污染,細菌污染后顯微鏡下觀察呈現(xiàn)有黑色細條沙狀,當然,根據(jù)感染的細菌不同,所呈現(xiàn)的狀態(tài)也不盡相同,有球形、桿狀等,其次,培養(yǎng)液發(fā)黃,變渾濁,可明顯看見培養(yǎng)皿中有細沙狀的沉淀物,時不時還有異樣氣味發(fā)出,如下圖所示:

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  處理方法:
  在培養(yǎng)基中加入抗生素處理,可以用四環(huán)素,慶大霉素,或者鏈霉素,前兩者的工作濃度是50 μg/mL;鏈霉素的工作濃度是100 μg/mL。但是,細胞本身也有影響,狀態(tài)大不如從前,所以,防范于未然,正確操作、嚴格執(zhí)行無菌操作規(guī)范,定期清理消毒培養(yǎng)設施才是關鍵!
 

  二、真菌污染

  真菌污染培養(yǎng)液清亮透明,不會像細菌感染大爆發(fā),所以很難早期發(fā)現(xiàn),鏡下有時候象絲狀,有時候象珊瑚狀,慢慢地會長出很細的黑色絲狀物,這個時候,已經(jīng)晚了,細胞很難救活了。

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  處理方法:趕緊扔掉,不要再想挽救,即使再珍貴。然后消毒滅菌培養(yǎng)間,CO2孵箱,器皿和培養(yǎng)液。
 

  三、霉菌污染

  同真菌感染一致,因為培養(yǎng)液是清亮的,所以霉菌污染早期難以發(fā)現(xiàn),等發(fā)現(xiàn)時往往已經(jīng)為時過晚了。培養(yǎng)液中慢慢地出現(xiàn)絮狀雜質,鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,如同風中柳絮,一般不仔細看發(fā)覺不出來。細胞仍可生長,但時間一長,細胞的狀態(tài)就變差,不再增長。見下圖。

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  處理方法:建議果斷舍棄該污染細胞,將環(huán)境消毒,因為霉菌的頑固可能會導致下幾批細胞都會污染,所以,采用酒精底地擦洗一遍CO2孵箱。然后再用新潔爾滅擦洗一遍,把水盤里加上飽和量的硫酸銅。千萬不可大意!
 

  四、支原體感染

  培養(yǎng)液變渾濁,支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是細胞狀態(tài)變差、生長變慢,在顯微鏡下觀察可能會有小黑點,但培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁。細胞傳代以后就出現(xiàn)細胞間黑點,細胞空泡化,很多類似凋亡、壞死的細胞,最終細胞漂浮,死亡。

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  處理方法:
  如果不是很珍貴的細胞的話,建議直接扔了吧。還是那句話,預防為主,如果是珍貴的細胞的話,建議使用——支原體清除培養(yǎng)基。

  好物推薦——支原體清除培養(yǎng)基

  此款支原體清除培養(yǎng)基是在市面上已有的支原體清除培養(yǎng)基基礎上開發(fā)的新一代產(chǎn)品,含有清除支原體的特殊成分(一種混合制劑,可通過抑制DNA和支原體生長所必須的相關蛋白合成來取得良好的支原體清除效果,挽救珍貴的細胞,減少因支原體污染帶來的損失)。

  此產(chǎn)品經(jīng)過了數(shù)十種細胞的測試和長期的實驗驗證,對細胞無害,對清除支原體污染效果好,能夠很好的抑制和殺滅支原體。并且安全可靠,工作濃度低,無細胞毒性。

  使用支原體清除培養(yǎng)基處理污染細胞前后對比圖:

  

TIM截圖20190820152502.png

 


  五、黑膠蟲污染

 

  開始污染時對細胞無影響,當數(shù)量達到一定程度時就會對細胞產(chǎn)生影響。400倍顯微鏡下可見點狀或片狀游動小體,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。

 

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  處理方法:可以增加細胞的種板密度,以提高細胞的生存率,盡早處理細胞,越快越好。如果實在來不及了,推薦使用——黑膠蟲清除培養(yǎng)基

  好物推薦——黑膠蟲清除培養(yǎng)基

   黑膠蟲清除培養(yǎng)基經(jīng)過了上百種細胞的測試和長期的實驗驗證,對細胞無害,對清除“黑膠蟲"污染效果好,能夠很好的殺滅和抑制“黑膠蟲",其它品牌的支原體培養(yǎng)基。

  使用黑膠蟲清除培養(yǎng)基理污染細胞前后對比圖:

TIM截圖20191213151321.png

 

 

  溫馨提醒:

  學會對各種污染情況的辨別和處理是一項的實驗技能,希望大家在看完我們的文章后結合你的實驗操作,學會如何應對細胞污染。

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